Pregunta 165 · FIR 2022 · Técnicas instrumentales de análisis

Por qué es la correcta y por qué no las otras

El detector de índice de refracción (IR) es universal: mide la diferencia de índice de refracción entre el eluyente que sale de la columna y una celda de referencia. Responde a cualquier sustancia disuelta, también a la propia fase móvil. En gradiente la composición del eluyente cambia de forma continua, así que su índice de refracción cambia y la línea base deriva sin parar. La señal del analito queda enmascarada. Además es muy sensible a la temperatura y poco sensible en general. Por eso el IR solo se usa en elución isocrática. Típico en azúcares o polímeros (GPC), que no absorben en UV.

Por qué no las otras

• 1. Absorbancia UV-Vis: es el detector más usado en HPLC y admite gradiente sin problema si los disolventes son transparentes a la λ de trabajo (acetonitrilo, agua). Solo deriva si un disolvente absorbe.
• 2. Fluorescencia: muy sensible y selectiva. Los disolventes habituales no fluorescen, de modo que el gradiente apenas altera la línea base. Es compatible.
• 3. Electroquímico (amperométrico): mide la oxidación o reducción del analito. El gradiente puede dar algo de ruido por cambios de conductividad, pero se usa con gradiente y no se considera incompatible, al contrario que el IR.

Clave para el FIR: Índice de refracción: detector universal, poco sensible y sensible a la temperatura, que detecta también la fase móvil. Por eso es incompatible con gradiente y solo se usa en isocrático.