Pregunta 133 · FIR 2023 · Biología molecular y genética

Por qué es la correcta y por qué no las otras

Las endonucleasas de restricción son enzimas bacterianas que cortan ADN de doble cadena en secuencias diana concretas. Son la herramienta básica de la clonación molecular: cortan vector e inserto con la misma enzima, generan extremos compatibles y la ADN ligasa los une para formar ADN recombinante. Que sean termolábiles no impide nada. Al contrario, permite inactivarlas por calor tras la digestión, antes de la ligación. La termoestabilidad es crítica para la polimerasa de la PCR (Taq), no para las enzimas de restricción. Por eso la afirmación incorrecta es la 3.

Por qué no las otras

• 1. Secuencias palindrómicas, ejemplo GATC. Es cierta: GATC leída 5'→3' en ambas hebras es idéntica, y es la diana de MboI/DpnI/Sau3AI. La mayoría de dianas de tipo II son palíndromos de 4-8 pb.
• 2. Corte en un sitio preciso. Es cierta para las de tipo II, las usadas en el laboratorio: cortan dentro de su secuencia de reconocimiento o junto a ella, siempre en la misma posición. Las de tipo I cortan lejos y al azar.
• 4. Extremos romos o cohesivos según la enzima. Es cierta: EcoRI deja extremos cohesivos protuberantes en 5'; PstI, protuberantes en 3'; SmaI o EcoRV dejan extremos romos.

Clave para el FIR: Las enzimas de restricción (tipo II) reconocen palíndromos, cortan en sitios precisos dejando extremos romos o cohesivos y son pieza central de la clonación; la termoestabilidad importa en la Taq polimerasa.