Grupo II · Exame Nacional Biologia e Geologia Época especial 2025

GRUPO II

Numa aula de Biologia e Geologia, os alunos realizaram uma experiência para extrair DNA de fruta. O protocolo de extração de DNA envolve lise celular com libertação de todo o material intracelular e purificação do DNA. Com a lise celular são libertados para a solução todos os compostos intracelulares: proteínas, lípidos, polissacáridos, ácidos nucleicos, moléculas orgânicas de baixo peso molecular e iões. O rompimento mecânico ocorre por meio da pressão exercida sobre o material biológico. Utiliza-se ainda um detergente, para completar a lise celular, e sal (NaCl), cujos catiões neutralizam as cargas negativas das moléculas de DNA, o que permite a sua visualização. O processo de extração do DNA implica também a utilização de proteases (enzimas hidrolíticas) e de etanol a frio, uma vez que o DNA é insolúvel neste solvente.

Nesta experiência, foi utilizado o protocolo seguinte:

Cortar o fruto (cerca de 50 g), em pedaços pequenos, para dentro de um almofariz e macerar bem.

Deitar num copo 100 mL de água quente (60 °C), adicionar 3 g de sal (NaCl) e 10 mL de detergente da loiça. Mexer bem.

Juntar o fruto esmagado à solução anterior e mexer lentamente, durante alguns minutos.

Colocar um filtro de papel num funil e coar a mistura anterior para um tubo de ensaio.

Adicionar ao líquido filtrado cerca de 25 mL de uma solução com proteases.

Adicionar etanol a 70% refrigerado (verter cuidadosamente o etanol pelas paredes do tubo de ensaio).

Observar a formação de uma fase alcoólica sobre uma fase aquosa.

Deixar repousar cerca de 5 minutos.

Observar a formação de filamentos esbranquiçados, correspondentes ao DNA.

A Figura 2 representa os resultados obtidos.

Baseado em: R. Oliveira, Genes e Genomas, protocolos das aulas práticas, Universidade do Minho, 2012.

2.

Considerando a sequência de nucleótidos 5′ ATTGCCAAG 3′, pertencente a uma das cadeias de DNA, a sequência de nucleótidos da cadeia complementar é

3.

Identifique a principal etapa do procedimento que permitiu obter apenas moléculas de DNA, a partir da cromatina. Justifique a sua resposta.