Grupo II - 1 · Exame Nacional Biologia e Geologia Época especial 2025

GRUPO II

Numa aula de Biologia e Geologia, os alunos realizaram uma experiência para extrair DNA de fruta. O protocolo de extração de DNA envolve lise celular com libertação de todo o material intracelular e purificação do DNA. Com a lise celular são libertados para a solução todos os compostos intracelulares: proteínas, lípidos, polissacáridos, ácidos nucleicos, moléculas orgânicas de baixo peso molecular e iões. O rompimento mecânico ocorre por meio da pressão exercida sobre o material biológico. Utiliza-se ainda um detergente, para completar a lise celular, e sal (NaCl), cujos catiões neutralizam as cargas negativas das moléculas de DNA, o que permite a sua visualização. O processo de extração do DNA implica também a utilização de proteases (enzimas hidrolíticas) e de etanol a frio, uma vez que o DNA é insolúvel neste solvente.

Nesta experiência, foi utilizado o protocolo seguinte:

Cortar o fruto (cerca de 50 g), em pedaços pequenos, para dentro de um almofariz e macerar bem.

Deitar num copo 100 mL de água quente (60 °C), adicionar 3 g de sal (NaCl) e 10 mL de detergente da loiça. Mexer bem.

Juntar o fruto esmagado à solução anterior e mexer lentamente, durante alguns minutos.

Colocar um filtro de papel num funil e coar a mistura anterior para um tubo de ensaio.

Adicionar ao líquido filtrado cerca de 25 mL de uma solução com proteases.

Adicionar etanol a 70% refrigerado (verter cuidadosamente o etanol pelas paredes do tubo de ensaio).

Observar a formação de uma fase alcoólica sobre uma fase aquosa.

Deixar repousar cerca de 5 minutos.

Observar a formação de filamentos esbranquiçados, correspondentes ao DNA.

A Figura 2 representa os resultados obtidos.

Baseado em: R. Oliveira, Genes e Genomas, protocolos das aulas práticas, Universidade do Minho, 2012.

1. Identifique, de entre as afirmações relativas às etapas do procedimento de extração do DNA, as três afirmações que as justificam corretamente.

Escreva, na folha de respostas, os números selecionados.