Guía de Laboratorio: Propiedades de Proteínas y Enzimas

Texto del documento

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN Pág. 1 de 6 GUÍA DE LABORATORIO NRO. 04 PROGRAMA: Nutrición EXPERIENCIA CURRICULAR: Biología Celular y Molecular CICLO: II TURNO: SEMESTRE: 2025-2 DOCENTE: Mg. Ronald Hugo Rosales Meza SESIÓN Nº: 4 LUGAR: Laboratorio de Nutrición I. TEMA: Propiedades de las proteínas y enzimas. II. RESULTADO DE APRENDIZAJE: El estudiante identifica experimentalmente la presencia de proteínas y evalúa la actividad enzimática en diferentes condiciones, interpretando su relevancia en procesos metabólicos y su aplicación en la evaluación nutricional de los alimentos. III.

OBJETIVO Detectar cualitativamente la presencia de proteínas en muestras alimentarias mediante la prueba de Biuret. Observar y cuantificar la actividad enzimática utilizando una enzima modelo (como la catalasa, amilasa o pepsina), bajo diferentes condiciones experimentales (temperatura, pH, concentración del sustrato). Describir la estructura básica de las proteínas y la función de las enzimas como biocatalizadores en el metabolismo humano. IV. FUNDAMENTO TEÓRICO Los ácidos y las bases son especies químicas que se disocian parcial o totalmente produciendo iones H+ (hidrogenes) e iones OH- (oxhidrilos) respectivamente.

Por tanto, una solución es acida cuando la concentración de iones H+ supera la concentración de iones y, en caso contrario, es básica. El pH (potencial de hidrogeno) es otra forma de expresar la acidez o la basicidad de una solución y se define como menos el logaritmo de la concentración molar de iones H+ El pH de una solución se puede determinar por medio de un indicador o de un pH metro. El indicador es una sustancia química que cambia de color dentro de un rango determinado de pH. Los ácidos enrojecen el papel tornasol azul; las bases colorean de azul el papel tornasol rojo y enrojecen la fenolftaleína.

El pH obtenido por medio de indicadores es aproximado y, por lo general, es de uso FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN Pág. 2 de 6 cualitativo. Por su parte, el pH metro es un instrumento que mide electrónicamente el pH de una solución con bastante precisión. El docente procederá a preguntar a los alumnos sobre el tema de la sesión de prácticas, lluvia de ideas y trabajaran con los siguientes documentos: Guía de prácticas de laboratorio Protocolo de seguridad en laboratorio V. RECURSOS: A. EQUIPOS Estufa de incubación Baño María B. MATERIAL Tubos de ensayo Gradilla Luna de reloj Vaso de precipitados Pinzas Cuchillo Tabla de picar Rallador Mortero C.

INSUMO Reactivo de Biuret Lugol H O al 3% Soluciones tampón con pH 4, 7 y 9 Agua destilada Hígado fresco o papa cruda (fuente de catalasa) Clara de huevo diluida 10 ml de leche Clara de huevo Gelatina D. EPP FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN Pág. 3 de 6 Guardapolvo Gorra (cofia) Mascarillas Guantes de látex Papel toalla Jabón liquido Se utilizarán los siguiente materiales y equipos: Materiales de laboratorio Equipos de laboratorio Papel toalla Jabón liquido Enseres y utensilios de cocina Bibliografía a base de libros y páginas web Material impreso y texto Pizarra Plumones VI.

PROTOCOLOS DE SEGURIDAD: Los estudiantes serán responsables de cumplir con el Protocolo de Seguridad en Laboratorios de Química y Afines de la UNIVERSIDAD CÉSAR VALLEJO S.A.C, dentro de las actividades de los diferentes laboratorios, con el objeto de realizar una práctica segura, previniendo la exposición innecesaria a riesgos físicos personales o a sus compañeros. En el siguiente link encontrara el protocolo de seguridad de nuestra casa de estudios: https://drive.google.com/file/d/1DTvsKB2iHIww7PSGv6R7FYyr7SjD-s5z/view?usp=drive_link Ropa El Guardapolvo deberá cubrir completamente o reemplazar la ropa de calle.

El Guardapolvo deberá usarse cerrado (abotonado) para que sea efectiva la protección. Su utilización deberá restringirse única y exclusivamente al interior del laboratorio. Cabello/Calzado Se llevará el pelo siempre recogido y con gorro o toca. No se llevará pulseras, colgantes, mangas anchas bufandas, etc., sandalias u otro tipo de calzado que deje el pie al descubierto. Manos El lavado de manos deberá ser frecuente y siempre después de manipular algún alimento que genere mucho desperdicio. Principales reglas de Seguridad Se contará con un Kit de seguridad y Botiquín. FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN Pág. 4 de 6 VII.

DESARROLLO DE ACTIVIDADES: El trabajo se realiza en grupos asignados previamente y ubicados en un módulo de trabajo, cada integrante debe participar activamente. Se deben seguir estrictamente los pasos indicados en la guía experimental y las instrucciones del docente. Cualquier duda debe ser consultada con el docente antes de proceder. El estudiante debe registrar cuidadosamente sus observaciones, esquemas y resultados. Detección de proteínas con la prueba de Biuret La prueba de Biuret detecta enlaces peptídicos presentes en proteínas. En presencia de proteínas, la solución adquiere una coloración violeta.

Para la realización de este experimento se debe seguir los siguientes pasos: Coloca 2 ml de cada muestra alimentaria en tubos de ensayo separados. Agrega 2 ml de solución de Biuret a cada tubo. Agita suavemente y observa los cambios de color después de 2-3 minutos. Registra los resultados. Muestra Cambio de color Presencia de proteínas Clara de huevo Leche Gelatina Agua Actividad de la catalasa sobre el peróxido de hidrógeno La catalasa descompone el H O en agua y oxígeno, generando efervescencia visible. Su actividad puede variar con el pH o la temperatura.

Para la realización de este experimento se debe seguir los siguientes pasos: Tritura un trozo de hígado o papa para obtener un extracto enzimático. En tubos diferentes, agrega: 5 ml de H O 1 ml del extracto enzimático Repite el ensayo a distintas temperaturas (fría, 37°C, caliente). Repite también con distintos pH. Observa y mide la intensidad de la efervescencia (puedes usar una escala cualitativa de 0 a 5). Registra los datos. Condición Efervescencia Actividad relativa pH 4 pH 7 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN Pág. 5 de 6 pH 9 Temperatura fría Temperatura 37°C Temperatura caliente (>60°C) VIII.

CONCLUSIONES: La práctica de laboratorio permitió integrar los contenidos teóricos revisados en clase, adquieren y/o fortalecen habilidades practicas esenciales en la identificación cualitativa de proteínas y la actividad enzimática. IX. EVALUACIÓN: Práctica calificada X. OBSERVACIONES Y RECOMENDACIONES: Se deben seguir estrictamente los pasos indicados en la guía experimental y las instrucciones del docente. El estudiante debe realizar la practica de laboratorio con todos sus implementos de bioseguridad. XI. BIBLIOGRAFÍA XII.

ANEXOS Se adjunta cuadros para el desarrollo de la sesión de prácticas y para la presentación de sus informes después de la practica realizada en laboratorio de nutrición. REFERENCIA Alberts, B. et al. (2019). Biología Molecular de la Célula. Editorial Médica Panamericana. Lodish, H. et al. (2021). Biología Celular y Molecular. Editorial Reverté. Lehninger, A. et al. (2020). Principios de Bioquímica. Editorial Omega. Deen, W. M., et al. (2018). Fisiología y Biología Molecular para Ciencias de la Salud. McGraw-Hill. FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN Pág.

6 de 6 Cuadro 01: Detección de proteínas con la prueba de Biuret Muestra Cambio de color Presencia de proteínas Clara de huevo Leche Gelatina Agua Cuadro 02: Actividad de la catalasa sobre el peróxido de hidrógeno Condición Efervescencia Actividad relativa pH 4 pH 7 pH 9 Temperatura fría Temperatura 37°C Temperatura caliente (>60°C) Esquematice y/o grafique sus observaciones: