Pregunta 165 · FIR 2024 · Técnicas instrumentales de análisis

Por qué es la correcta y por qué no las otras

En fase inversa la fase estacionaria (C18) es apolar y la fase móvil, polar. El metanol es el modificador orgánico, el componente «fuerte» que arrastra a los solutos. Pasar de 70:30 a 50:50 reduce el metanol: la fase móvil se vuelve más polar y con menor fuerza eluyente. Los solutos, relativamente apolares, se reparten más hacia la C18. Aumenta el factor de retención k y, con él, el tiempo de retención de ambos solutos. Como regla práctica, cada 10% menos de orgánico multiplica k aproximadamente por 2-3.

Por qué no las otras

• 1. Disminución del tiempo de retención: es justo lo contrario. Ocurriría al aumentar la proporción de metanol (p. ej., 70:30 → 90:10) en fase inversa, o al hacer la fase móvil más polar en fase normal.
• 3. Picos más estrechos: al aumentar la retención, los solutos pasan más tiempo en la columna y sufren más difusión. Los picos suelen ensancharse, no estrecharse. Se estrechan al eluir antes o al usar gradiente.
• 4. Ningún cambio: la composición de la fase móvil es el principal parámetro para ajustar la retención en HPLC. Cambiarla modifica k, tR y la resolución.

Clave para el FIR: En fase inversa, menos disolvente orgánico (fase móvil más polar, más débil) significa más retención. Más orgánico significa menos retención. En fase normal ocurre al revés.