Pregunta General 1 · Microbiología I UB Recull de preguntes d'examen resoltes: Microbiologia I

Descriviu el procediment per aïllar, cultivar de forma òptima i conservar a llarg termini un bacteri que presenti el següent perfil fisiològic: quimioheteròtrof, psicròtrof, halòfil moderat, anaerobi facultatiu i alcalòfil, partint d'una mostra ambiental de fang.

Solución: 1. Fase d'aïllament: Es realitzen dilucions binoculars o seriades de la mostra de fang en solució salina estèril suplementada amb NaCl (~3-5% p/v). Se sembra per esgotament en placa en un medi nutritiu sòlid enriquit ajustat a pH alcalí (pH 8,5-9,5). S'incuba en condicions aeròbies o anòxiques a temperatures baixes pròpies de psicròtrofs (~4-7 °C, permetent creixement fins a 20 °C). 2. Fase de cultiu òptim: Disseny d'un medi químicament definit o complex amb fonts orgàniques de carboni i energia (glucosa, peptones), suplementat amb NaCl al voltant del 3-5% (halòfil moderat) i amortidors alcalins (tampons carbonat o Tris a pH 9). En tractar-se d'un anaerobi facultatiu, pot créixer tant en aerobiosi com en anòxia. 3. Conservació: Conservació en fred per a l'ús diari i liofilització o ultracongelació a -80 °C en presència d'un crioprotector (com glicerol al 15-20%) per al manteniment indefinit de la soca.