Exercici Final 8 · Microbiología I UB Recull de preguntes d'examen resoltes: Microbiologia I

Com dissenyaríeu un procediment al laboratori per aïllar una soca mutant auxòtrofa per a prolina ($Pro^-$) i alhora resistent al cloramfenicol ($Cm^R$)?

Solución: 1. S'aplica la tècnica de sembra en rèplica (estampat sobre vellut) a partir d'un cultiu prèviament mutagenitzat. 2. Es prepara una primera placa de medi enriquit que contingui l'antibiòtic cloramfenicol: aquí només proliferaran els clons resistents al cloramfenicol, actuant com a filtre selectiu directe. 3. A partir d'aquestes colònies resistents, es replica en dues plaques comparatives: - Una placa de control amb medi mínim suplementat amb tots els aminoàcids incloent la prolina (o medi complet amb cloramfenicol). - Una placa amb medi selectiu sense prolina (amb cloramfenicol). 4. Les colònies que creixen al medi amb prolina però són incapaces de créixer a la placa sense prolina corresponen als mutants auxòtrofs desitjats ($Pro^-$, $Cm^R$).