Ejercicio 6 - Western blot, proteòmica i immunotècniques · Biología Celular UB Recull Temàtic d'Exàmens de Biologia Cel·lular

a. En relació a l'electroforesi bidimensional (2D-PAGE):

Solución: 1. Permet conèixer el punt isoelèctric del polipèptid / 3. Dues proteïnes amb la mateixa càrrega es poden separar per pes molecular a la segona dimensió / 4. Habitualment s'aplica primer un isoelectroenfocament i després un SDS-PAGE

b. Per analitzar una mostra proteica per Western blot, caldrà:

Solución: 1. Separar les proteïnes per electroforesi en gel / 2. Transferir els polipèptids a una membrana / 4. Incubar el suport amb anticossos específics

c. Assenyaleu les afirmacions certes sobre la immunocitoquímica:

Solución: 1. Permet conèixer la distribució microscòpica d'antígens proteics en cèl·lules / 3. Requereix la incorporació d'anticossos acoblats a marcadors

d. En les anàlisis proteòmiques modernes:

Solución: 1. L'espectrometria de masses permet identificar proteïnes resoltes en gels / 2. Permeten establir el pes molecular amb alta precisió / 3. El 2D-PAGE permet discriminar milers de proteïnes d'un extracte cru / 4. L'espectrometria en tàndem (MS/MS) permet deduir la seqüència peptídica

e. Respecte al Western blot o immunotransferència:

Solución: 2. Es basa en l'afinitat específica d'anticossos cap a l'antigen / 4. Identifica polipèptids específics immobilitzats sobre una membrana

f. Pel que fa als anticossos monoclonals:

Solución: 2. Són generats per línies d'hibridomes procedents de la fusió de limfòcits B i cèl·lules de mieloma / 3. Es poden conjugar amb fluorocroms per a aplicacions d'immunofluorescència

g. Per quantificar quantes cèl·lules d'una placa han incorporat un precursor radioactiu:

Solución: 3. Autoradiografia cel·lular