1. Ácidos nucleicos como agentes terapéuticos
Flashcards
- ¿Qué son los oligonucleótidos antisentido?
- Moléculas que interactúan con el material genético para bloquear la producción de proteínas.
- ¿Qué son los plásmidos y cuál es su función en la transfección génica?
- Son moléculas de ADN circular que se replican de forma autónoma y se utilizan para introducir genes en las células.
- ¿Qué son las ribozimas?
- Enzimas hechas de ARN que catalizan reacciones específicas.
- ¿Qué son los aptámeros y cómo se seleccionan?
- Oligonucleótidos que se unen a dianas moleculares con alta afinidad, seleccionados mediante el método SELEX.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es la función principal de un oligonucleótido antisentido?
- a) Unirse al ADN para replicarlo.
- b) Bloquear la traducción o modificar el procesamiento del ARNm.
- c) Activar la transcripción de genes específicos.
- d) Reparar errores en la secuencia del ADN.
Respuesta: b) Bloquear la traducción o modificar el procesamiento del ARNm.. Los oligonucleótidos antisentido están diseñados para unirse complementariamente al ARNm, impidiendo la síntesis de proteínas o alterando el procesamiento del ARNm.
- ¿Qué son los plásmidos?
- a) Moléculas de ARN monocatenario.
- b) Moléculas pequeñas de ADN circular capaces de replicarse autónomamente.
- c) Enzimas que catalizan la replicación del ADN.
- d) Fragmentos de proteínas utilizados en la terapia génica.
Respuesta: b) Moléculas pequeñas de ADN circular capaces de replicarse autónomamente.. Los plásmidos son moléculas de ADN circular extracromosómicas que pueden replicarse independientemente del cromosoma celular y se utilizan para introducir genes en las células.
- ¿Cuál es el mecanismo de acción de los ARN interferentes (RNAi)?
- a) Activan la transcripción de genes específicos.
- b) Interfieren con la expresión de genes al unirse al ADN.
- c) Interfieren con la expresión de un gen particular que comparte una secuencia homóloga con dsRNA.
- d) Reparan errores en la secuencia del ADN.
Respuesta: c) Interfieren con la expresión de un gen particular que comparte una secuencia homóloga con dsRNA.. Los ARN interferentes (RNAi) son moléculas que silencian genes al unirse al ARNm y degradarlo o al impedir su traducción.
2. Plásmidos
Flashcards
- ¿Qué son los plásmidos?
- Moléculas pequeñas de ADN circular capaces de replicarse de forma autónoma.
- ¿Qué es la transfección génica?
- Proceso por el cual secuencias de ácidos nucleicos son introducidas en el interior de una célula.
- ¿Qué indica que un plásmido se replique de forma autónoma?
- Que puede copiarse a sí mismo independientemente del cromosoma celular.
- ¿Qué tipo de transfección se produce si el plásmido se integra en el cromosoma?
- Transfección estable.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es la principal característica de los plásmidos?
- a) Son estructuras lineales de ARN.
- b) Son moléculas de ADN circular capaces de replicarse de forma autónoma.
- c) Son proteínas que catalizan reacciones celulares.
- d) Son lípidos que forman la membrana celular.
Respuesta: b) Son moléculas de ADN circular capaces de replicarse de forma autónoma.. Los plásmidos son moléculas de ADN circular que tienen la capacidad de replicarse independientemente del cromosoma celular, lo que los convierte en herramientas útiles en la terapia génica.
- En el contexto de la terapia génica, ¿qué función tienen los plásmidos?
- a) Actúan como agentes antivirales directos.
- b) Transportan secuencias de ADN al interior de las células.
- c) Reparan directamente genes defectuosos.
- d) Inhiben la replicación del ADN celular.
Respuesta: b) Transportan secuencias de ADN al interior de las células.. Los plásmidos se utilizan como vectores para introducir secuencias de ADN terapéuticas en las células, facilitando así la terapia génica.
- ¿Qué significa que un plásmido tenga la capacidad de replicarse de forma autónoma?
- a) Depende del ADN de la célula huésped para su replicación.
- b) Se replica solo en presencia de un virus.
- c) Puede copiarse a sí mismo independientemente del cromosoma celular.
- d) Necesita de la transcripción para replicarse.
Respuesta: c) Puede copiarse a sí mismo independientemente del cromosoma celular.. La replicación autónoma significa que el plásmido posee los mecanismos necesarios para copiarse a sí mismo sin depender del ADN cromosómico de la célula huésped.
3. Ribozimas
Flashcards
- ¿Qué son las ribozimas?
- Enzimas compuestas de ARN (ácido ribonucleico) que catalizan reacciones químicas específicas.
- ¿Quiénes recibieron el Premio Nobel de Química en 1989 por el descubrimiento de las ribozimas?
- Sid Altman y Tom Cech.
- ¿Cuál es una función clave de la ribozima del ribosoma (ARNr 23S)?
- Catalizar la formación del enlace peptídico durante la síntesis de proteínas.
- ¿Qué estructura secundaria es típica en las ribozimas?
- Tres regiones de 'stem' (tallo).
Preguntas tipo test
- ¿Cuál de las siguientes NO es una característica de las ribozimas?
- a) Son enzimas
- b) Están compuestas de ARN
- c) Son proteínas
- d) Pueden catalizar reacciones químicas
Respuesta: c) Son proteínas. Las ribozimas son enzimas compuestas de ácido ribonucleico (ARN), no de proteínas. Pueden catalizar reacciones químicas específicas.
- ¿Qué científico recibió el Premio Nobel de Química en 1989 por su trabajo con las ribozimas?
- a) James Watson
- b) Francis Crick
- c) Sid Altman y Tom Cech
- d) Rosalind Franklin
Respuesta: c) Sid Altman y Tom Cech. Sid Altman y Tom Cech recibieron el Premio Nobel de Química en 1989 por su descubrimiento de las propiedades catalíticas del ARN, específicamente en las ribozimas.
- ¿Cuál es la función principal de la ribozima del ribosoma (ARNr 23S)?
- a) Cortar el ARNm
- b) Catalizar la formación del enlace peptídico durante la síntesis de proteínas
- c) Inhibir la angiogénesis
- d) Atacar el virus de la hepatitis C
Respuesta: b) Catalizar la formación del enlace peptídico durante la síntesis de proteínas. La ribozima del ribosoma (ARNr 23S) cataliza la formación del enlace peptídico durante la síntesis de proteínas, un proceso esencial para la vida celular.
4. Aptámeros
Flashcards
- ¿Qué son los aptámeros?
- Oligonucleótidos monocatenarios plegados que se unen a dianas moleculares con alta afinidad y especificidad.
- ¿Cuál es la función principal de los aptámeros?
- Reconocer y unirse a dianas moleculares, bloqueando interacciones proteína-proteína.
- ¿Qué significa SELEX?
- Systematic Evolution of Ligands by EXponential Enrichment (Evolución Sistemática de Ligandos por Enriquecimiento Exponencial).
- ¿Qué tipos de ácidos nucleicos pueden ser aptámeros?
- ADN de cadena sencilla (ssDNA) y ARN.
Preguntas tipo test
- ¿Qué propiedad fundamental permite a los aptámeros unirse a sus dianas moleculares con alta afinidad y especificidad?
- a) Su capacidad para formar enlaces peptídicos complejos.
- b) Su habilidad para replicarse independientemente del ADN celular.
- c) Sus estructuras terciarias únicas que les permiten plegarse en andamios estables.
- d) Su capacidad para modificar el procesamiento del ARNm.
Respuesta: c) Sus estructuras terciarias únicas que les permiten plegarse en andamios estables.. Los aptámeros se distinguen por sus estructuras terciarias únicas, que les permiten plegarse en andamios estables. Esta característica es crucial para el reconocimiento molecular y la unión a dianas con alta afinidad y especificidad.
- ¿Cuál es el rango de longitud típico de un aptámero, incluyendo las secuencias fijas en sus extremos?
- a) Entre 15 y 25 nucleótidos.
- b) Entre 30 y 50 nucleótidos.
- c) Entre 70 y 100 nucleótidos.
- d) Entre 150 y 200 nucleótidos.
Respuesta: c) Entre 70 y 100 nucleótidos.. La longitud total de un aptámero generalmente varía entre 70 y 100 nucleótidos. Esta longitud incluye una región central de tamaño variable y dos regiones de secuencia conocida o 'primer' en cada extremo, necesarias para su amplificación.
- ¿Qué tipo de interacciones son cruciales para la unión de alta afinidad de los aptámeros a sus dianas moleculares?
- a) Interacciones iónicas y puentes disulfuro.
- b) Fuerzas de van der Waals, enlaces de hidrógeno e interacciones electrostáticas.
- c) Interacciones hidrofóbicas y enlaces éter.
- d) Enlaces peptídicos y uniones fosfodiéster.
Respuesta: b) Fuerzas de van der Waals, enlaces de hidrógeno e interacciones electrostáticas.. La unión de alta afinidad de los aptámeros a sus dianas moleculares está impulsada por una combinación de fuerzas de van der Waals, enlaces de hidrógeno e interacciones electrostáticas. Estas interacciones aseguran una unión estable y específica.
5. Interfering RNAs o RNAi
Flashcards
- ¿Qué significa RNAi?
- Interferencia por ARN (RNA interference)
- ¿Qué tipo de ARN induce el silenciamiento génico en el RNAi?
- ARN de doble cadena (dsRNA)
- ¿Cuál es la longitud típica de un miRNA?
- 21-25 nucleótidos
- ¿Cuál es el resultado del silenciamiento génico inducido por siRNA?
- Knock-down o Knock-out de la expresión génica
Preguntas tipo test
- ¿Qué tipo de ARN interfiere con la expresión de genes al compartir una secuencia homóloga?
- a) ARN de transferencia (tRNA)
- b) ARN mensajero (mRNA)
- c) ARN interferente (RNAi)
- d) ARN ribosómico (rRNA)
Respuesta: c) ARN interferente (RNAi). El ARN interferente (RNAi) es el mecanismo biológico donde el ARN de doble cadena (dsRNA) interfiere con la expresión de un gen particular que comparte una secuencia homóloga con el dsRNA.
- ¿Cuál es la longitud aproximada en nucleótidos de los ARN interferentes?
- a) 5-10 nucleótidos
- b) 10-15 nucleótidos
- c) 20-25 nucleótidos
- d) 30-35 nucleótidos
Respuesta: c) 20-25 nucleótidos. Los ARN interferentes son moléculas pequeñas que generalmente tienen entre 20 y 25 nucleótidos.
- ¿Cuál de los siguientes NO es un tipo principal de ARN interferente?
- a) siRNA (small interfering RNA)
- b) miRNA (micro-ARN)
- c) rRNA (ARN ribosómico)
- d) shRNA (short hairpin RNA)
Respuesta: c) rRNA (ARN ribosómico). Los tres grandes grupos de moléculas de ARN interferente son siRNA, miRNA y shRNA. El rRNA (ARN ribosómico) no pertenece a esta categoría.
6. Tipos de Transfección génica
Flashcards
- ¿Qué tipo de transfección utiliza virus modificados para introducir genes en las células?
- Transfección vírica
- ¿Qué método de transfección no vírica usa pulsos eléctricos para facilitar la entrada de ADN en la célula?
- Electroporación
- ¿Qué tipo de transfección utiliza liposomas para encapsular y entregar material genético a las células?
- Transfección mediada por liposomas
- ¿Cuál es una ventaja de usar métodos no víricos en la transfección génica?
- Menor riesgo de respuesta inmune
Preguntas tipo test
- ¿Cuál de los siguientes NO es un método de transfección no vírica?
- a) Liposomas
- b) Electroporación
- c) Adenovirus
- d) Nanocápsulas poliméricas
Respuesta: c) Adenovirus. Los adenovirus son vectores virales utilizados en la transfección vírica, mientras que los liposomas, la electroporación y las nanocápsulas poliméricas son métodos no víricos.
- ¿Qué tipo de transfección utiliza el mecanismo natural de los virus para introducir material genético en las células?
- a) Transfección química
- b) Transfección física
- c) Transfección vírica
- d) Electroporación
Respuesta: c) Transfección vírica. La transfección vírica se basa en la capacidad de los virus para infectar células e introducir su material genético, que en este caso se modifica para transportar el gen terapéutico.
- En la transfección mediada por liposomas, ¿qué característica facilita la fusión con la membrana celular?
- a) Carga negativa de los liposomas
- b) Capa bilipídica de los liposomas
- c) Presencia de proteínas virales en los liposomas
- d) Gran tamaño de los liposomas
Respuesta: b) Capa bilipídica de los liposomas. La capa bilipídica de los liposomas es similar a la estructura de las membranas celulares, lo que facilita la fusión y la liberación del material genético dentro de la célula.
7. Transfección Vírica
Flashcards
- ¿Qué mecanismo utilizan los virus en la transfección vírica para entrar en las células?
- Utilizan su mecanismo natural de infección.
- ¿Qué tipos de virus se utilizan comúnmente en la transfección vírica?
- Adenovirus, adenoasociados, retrovirus y lentivirus.
- ¿Qué problema de seguridad importante está asociado con la transfección vírica?
- Riesgo de recombinación de genes y problemas de inmunogenicidad.
- ¿Qué hacen los virus oncolíticos en las células tumorales?
- Causan la lisis de las células tumorales y activan el sistema inmune.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es el principal problema de seguridad asociado con la transfección vírica?
- a) Baja eficiencia en la introducción del material genético
- b) Riesgo de recombinación de genes virales
- c) Alta toxicidad para las células huésped
- d) Inestabilidad del material genético transferido
Respuesta: b) Riesgo de recombinación de genes virales. La transfección vírica, al utilizar virus como vectores, conlleva el riesgo de que estos virus recombinen su material genético con el de la célula huésped, lo que podría generar efectos no deseados.
- ¿Qué tipo de virus se menciona como ejemplo en la transfección vírica?
- a) Bacteriófagos
- b) Retrovirus y Adenovirus
- c) Priones
- d) Viroides
Respuesta: b) Retrovirus y Adenovirus. El texto menciona el uso de adenovirus y retrovirus en la transfección vírica debido a su capacidad para introducir material genético en las células.
- ¿Cuál es el efecto de los virus oncolíticos en las células tumorales?
- a) Estimulan la diferenciación celular
- b) Inducen la lisis celular y activan el sistema inmune
- c) Bloquean la replicación viral
- d) Reparan el ADN dañado
Respuesta: b) Inducen la lisis celular y activan el sistema inmune. Los virus oncolíticos están diseñados para infectar y destruir selectivamente las células tumorales, induciendo la lisis celular y, además, activando el sistema inmune para combatir el tumor.
8. Proteínas recombinantes
Flashcards
- ¿Qué son los CCP?
- Péptidos penetrantes que facilitan la entrada de proteínas en las células.
- ¿Qué significa TAT en el contexto de proteínas recombinantes?
- Activador transcripcional transactivante.
- ¿Cuál es una ventaja de usar nanopartículas inorgánicas en la transfección?
- Buena estabilidad y protección para el material genético.
- ¿Qué problema principal presentan los liposomas catiónicos?
- Inestabilidad y baja eficiencia.
Preguntas tipo test
- ¿Qué función cumplen los péptidos penetrantes (CCP) en las proteínas recombinantes?
- a) Activar la transcripción genética
- b) Facilitar la entrada de la proteína en las células
- c) Inhibir la replicación viral
- d) Marcar la proteína para su degradación
Respuesta: b) Facilitar la entrada de la proteína en las células. Los péptidos penetrantes (CCP) facilitan la entrada de las proteínas recombinantes en las células, permitiendo que estas ejerzan su función terapéutica.
- ¿Cuál es la función principal del dominio intracelular CD3ζ en las células CAR T?
- a) Reconocer directamente un antígeno tumoral
- b) Fijar el CAR en la membrana celular
- c) Activar y expandir la célula T al reconocer el antígeno
- d) Dar flexibilidad y definir la distancia con la membrana
Respuesta: c) Activar y expandir la célula T al reconocer el antígeno. El dominio intracelular CD3ζ activa y expande la célula T al reconocer el antígeno, lo que permite una respuesta inmunitaria más fuerte contra las células tumorales.
- ¿Cuál de las siguientes NO es una ventaja de las nanopartículas inorgánicas en la transfección génica?
- a) Química muy avanzada
- b) Alta eficiencia de transfección
- c) Buena estabilidad y protección para el material genético
- d) No están sujetas a ataque microbiano
Respuesta: b) Alta eficiencia de transfección. Las nanopartículas inorgánicas generalmente tienen una eficiencia de transfección más baja en comparación con otros métodos, aunque ofrecen otras ventajas como la estabilidad y protección del material genético.
9. Métodos físicos de Transfección
Flashcards
- ¿Qué tipo de energía se utiliza en la electroporación para facilitar la transfección?
- Pulsos eléctricos
- ¿Qué método de transfección física implica la inyección directa de material genético en una célula?
- Microinyección
- ¿Qué tipo de ondas se utilizan en la sonotransfección para facilitar la transfección?
- Ondas de ultrasonido
- ¿En qué compartimento celular se introduce el material genético durante la nucleoinfección?
- Núcleo
Preguntas tipo test
- ¿Qué método de transfección física implica la aplicación de pulsos eléctricos para facilitar la entrada de material genético en las células?
- a) Microinyección
- b) Electroporación
- c) Sonotransfección
- d) Nucleoinfección
Respuesta: b) Electroporación. La electroporación utiliza pulsos eléctricos para crear poros temporales en la membrana celular, permitiendo que el material genético entre en la célula. Los otros métodos utilizan diferentes mecanismos.
- ¿Cuál de los siguientes métodos de transfección física implica el uso de ultrasonido para mejorar la entrega de material genético a las células?
- a) Microinyección
- b) Electroporación
- c) Sonotransfección
- d) Nucleoinfección
Respuesta: c) Sonotransfección. La sonotransfección utiliza ultrasonido para facilitar la entrada de material genético en las células. Los otros métodos emplean diferentes técnicas.
- ¿Qué método de transfección física implica la inyección directa de material genético en el núcleo de la célula?
- a) Microinyección
- b) Electroporación
- c) Sonotransfección
- d) Nucleoinfección
Respuesta: d) Nucleoinfección. La nucleoinfección implica la inyección directa de material genético en el núcleo celular, asegurando una entrega más eficiente del material genético. Los otros métodos no tienen como objetivo específico el núcleo.
10. Transfección No Vírica (Química)
Flashcards
- ¿Qué ventaja principal ofrece la transfección no vírica (química)?
- Elimina el riesgo inmunogénico asociado con los virus.
- Nombra tres tipos de materiales utilizados en la transfección no vírica (química).
- Polímeros catiónicos, nanocápsulas poliméricas, liposomas, dendrímeros, partículas inorgánicas.
- ¿Cuál es una limitación común de la transfección no vírica (química)?
- Baja eficiencia de transfección en comparación con los métodos virales.
- ¿Qué son los polímeros catiónicos y cómo ayudan en la transfección?
- Son moléculas cargadas positivamente que facilitan la unión y entrada del ADN, que está cargado negativamente, en la célula.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es una ventaja de la transfección no vírica (química) en comparación con la transfección vírica?
- a) Mayor eficiencia de transfección
- b) Eliminación del factor inseguro inmunogénico
- c) Mayor facilidad de uso
- d) Menor costo
Respuesta: b) Eliminación del factor inseguro inmunogénico. La transfección no vírica (química) elimina el factor inseguro inmunogénico, lo cual es una ventaja significativa sobre la transfección vírica.
- ¿Cuál de los siguientes NO es un problema asociado con la transfección no vírica (química)?
- a) Baja eficiencia de transfección
- b) Inmunogenicidad
- c) Dificultad en la vectorización
- d) Menor estabilidad del material genético
Respuesta: b) Inmunogenicidad. La inmunogenicidad es un problema asociado principalmente con la transfección vírica, no con la transfección no vírica (química).
- ¿Cuál de los siguientes componentes se utiliza en la transfección no vírica (química)?
- a) Retrovirus
- b) Adenovirus
- c) Polímeros catiónicos
- d) Virus oncolíticos
Respuesta: c) Polímeros catiónicos. Los polímeros catiónicos son uno de los componentes utilizados en la transfección no vírica (química) para facilitar la entrada del material genético en la célula.
11. Terapia Génica
Flashcards
- ¿Qué es la terapia génica?
- Técnica para corregir genes defectuosos responsables del desarrollo de una enfermedad.
- ¿Cuáles son las dos técnicas de terapia génica?
- Terapia génica in vivo y ex vivo
- ¿Qué son los aptámeros?
- Oligonucleótidos monocatenarios plegados que se unen a dianas moleculares con alta afinidad.
- ¿Qué son los plásmidos?
- Moléculas pequeñas de ADN circular capaces de replicarse de forma autónoma.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es el objetivo principal de la terapia génica?
- a) Reemplazar genes defectuosos por genes funcionales.
- b) Eliminar todas las células cancerosas del cuerpo.
- c) Mejorar el rendimiento físico de los individuos.
- d) Prevenir enfermedades infecciosas.
Respuesta: a) Reemplazar genes defectuosos por genes funcionales.. La terapia génica se enfoca en corregir genes defectuosos responsables del desarrollo de enfermedades, principalmente reemplazando los genes no funcionales por genes normales.
- ¿Cuál de las siguientes NO es una condición para una terapia génica exitosa?
- a) Tratamiento de enfermedades causadas por un solo gen defectuoso.
- b) Vectorizar el tratamiento a las células correctas.
- c) Alta respuesta inmune.
- d) Transfección eficiente.
Respuesta: c) Alta respuesta inmune.. Una alta respuesta inmune es indeseable en la terapia génica, ya que puede comprometer la eficacia y seguridad del tratamiento. Se busca una baja respuesta inmune para evitar complicaciones.
- ¿Qué tipo de molécula se utiliza en la terapia génica para silenciar genes específicos?
- a) Plásmidos.
- b) Ribozimas.
- c) siRNA (small interfering RNA).
- d) Aptámeros.
Respuesta: c) siRNA (small interfering RNA).. Los siRNA (small interfering RNA) son moléculas que inducen el silenciamiento génico post-transcripcional, bloqueando la expresión de genes específicos al degradar el ARNm correspondiente.
12. Terapia Génica técnicas "ex vivo"
Flashcards
- ¿Qué tipo de terapia génica implica la modificación de células fuera del cuerpo?
- Terapia génica ex vivo
- ¿Cuál es el principal obstáculo para el transgén en la matriz extracelular en la terapia génica ex vivo?
- Degradación por nucleasas
- ¿Cuál es la importancia de la vectorización en la terapia génica?
- Dirigir el tratamiento a las células correctas
- ¿Qué estructura celular debe alcanzar el transgén para ejercer su función?
- Núcleo
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es el principal desafío de la terapia génica ex vivo en relación con el material genético?
- a) Asegurar que el transgén se replique correctamente.
- b) Proteger el transgén de la degradación por nucleasas.
- c) Evitar la transcripción del transgén.
- d) Inhibir la traducción del transgén.
Respuesta: b) Proteger el transgén de la degradación por nucleasas.. El principal desafío es proteger el transgén de la degradación por las nucleasas presentes en la matriz extracelular e intracelular.
- ¿Qué barrera biológica debe superarse para que el transgén alcance su objetivo en la terapia génica ex vivo?
- a) Aumentar la velocidad de replicación celular.
- b) Facilitar la migración intracelular del transgén al núcleo.
- c) Disminuir la respuesta inmune del paciente.
- d) Inhibir la división celular.
Respuesta: b) Facilitar la migración intracelular del transgén al núcleo.. Es crucial facilitar la migración intracelular del transgén al núcleo para que pueda ejercer su función terapéutica.
- ¿Cuál es uno de los objetivos principales al vectorizar el tratamiento en la terapia génica?
- a) Asegurar la replicación del vector en todas las células del cuerpo.
- b) Dirigir el tratamiento a las células correctas de manera eficiente.
- c) Aumentar la respuesta inmune para eliminar células infectadas.
- d) Inhibir la expresión de todos los genes celulares.
Respuesta: b) Dirigir el tratamiento a las células correctas de manera eficiente.. La vectorización correcta asegura que el tratamiento alcance las células diana, maximizando su eficacia y minimizando efectos secundarios.
13. Terapia Génica técnicas "in vivo"
Flashcards
- ¿Qué son las nanopartículas en la terapia génica in vivo?
- Vehículos para transportar material genético directamente al cuerpo.
- ¿Qué ventajas ofrecen los métodos químicos basados en nanopartículas en la terapia génica?
- Eliminan el factor inmunogénico inseguro asociado con los métodos virales.
- ¿Qué es el efecto EPR en la terapia génica con nanopartículas?
- Aumento de la permeabilidad tumoral y drenaje linfático inefectivo, facilitando la acumulación de nanopartículas en el tumor.
- ¿Qué tipos de nanopartículas inorgánicas se utilizan en la terapia génica?
- Fosfato de calcio, nanotubos de carbono, sílice, oro y magnetita, entre otros.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es el principal desafío en la terapia génica in vivo?
- a) Asegurar la correcta vectorización del tratamiento a las células diana.
- b) Evitar la activación del sistema inmune.
- c) Lograr una transfección eficiente.
- d) Todas las anteriores.
Respuesta: d) Todas las anteriores.. El éxito de la terapia génica in vivo depende de múltiples factores, incluyendo la correcta vectorización, evitar la respuesta inmune y lograr una transfección eficiente.
- ¿Qué tipo de nanopartículas se utilizan en la terapia génica in vivo para combinar transfección génica y liberación de citotóxicos?
- a) Nanopartículas de oro.
- b) Nanopartículas de magnetita.
- c) Nanopartículas poliméricas.
- d) Todas las anteriores.
Respuesta: d) Todas las anteriores.. Se utilizan nanopartículas de oro, magnetita y poliméricas, entre otras, para combinar la transfección génica con la liberación de citotóxicos en la terapia génica in vivo.
- ¿Qué ventaja ofrecen las nanopartículas inorgánicas en comparación con otros métodos de transfección?
- a) Mayor eficiencia de transfección.
- b) Menor costo de producción.
- c) Mayor estabilidad y protección para el material genético.
- d) Mayor facilidad de administración.
Respuesta: c) Mayor estabilidad y protección para el material genético.. Las nanopartículas inorgánicas ofrecen buena estabilidad y protección para el material genético, además de no estar sujetas al ataque microbiano.
14. Métodos químicos basados en Nanopartículas
Flashcards
- ¿Qué ventaja ofrecen las nanopartículas inorgánicas en términos de estabilidad?
- Buena estabilidad y protección para el material genético.
- ¿Qué facilita la disolución del fosfato de calcio dentro del endosoma?
- El escape endosomal del material genético.
- ¿Cuál es una aplicación de los fulerenos en la terapia génica?
- Administración inhalada para reducir efectos secundarios en enfermedades pulmonares crónicas.
- ¿Qué problema presentan los lipoplejos en comparación con otras nanopartículas lipídicas?
- Inestabilidad y baja eficiencia en la transfección.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál de las siguientes NO es una ventaja de las nanopartículas inorgánicas en la transfección génica?
- a) Química muy avanzada
- b) Alta eficiencia de transfección
- c) Buena estabilidad y protección para el material genético
- d) No están sujetas al ataque microbiano
Respuesta: b) Alta eficiencia de transfección. Las nanopartículas inorgánicas generalmente tienen baja eficiencia de transfección en comparación con otros métodos.
- ¿Qué propiedad de las nanopartículas de fosfato de calcio facilita la captación de ADN por el núcleo?
- a) Su alta biocompatibilidad
- b) Su capacidad para disolverse dentro del endosoma
- c) La formación de complejos Ca-DNA
- d) Su interacción con la fase sólida del ácido nucleico
Respuesta: c) La formación de complejos Ca-DNA. Los complejos Ca-DNA mejoran la captación de ADN por el núcleo, facilitando la transfección.
- ¿Cuál es el principal beneficio de la administración inhalada de fulerenos en terapia génica?
- a) Aumenta la eficiencia de la transfección
- b) Reduce los efectos secundarios
- c) Permite la administración sistémica
- d) Facilita la internalización en todas las células
Respuesta: b) Reduce los efectos secundarios. La administración inhalada de fulerenos reduce los efectos secundarios en la terapia génica, especialmente en enfermedades pulmonares.
15. Resistencia a múltiples fármacos (MDR)
Flashcards
- ¿Qué es la MDR (Multidrug Resistance)?
- Resistencia a múltiples fármacos.
- ¿Cuál es una proteína antiapoptótica relacionada con la MDR?
- Bcl-2.
- ¿Qué hace la glicoproteína-P en la MDR?
- Expulsa fármacos de la célula.
- ¿Qué enfoque utiliza la nanomedicina contra la MDR?
- Combinación de transfección génica y liberación de citotóxicos.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál de las siguientes opciones describe mejor el mecanismo de resistencia a múltiples fármacos (MDR) mediado por bombas?
- a) Aumento de la apoptosis celular.
- b) Disminución de la expresión de proteínas antiapoptóticas.
- c) Expulsión activa de fármacos fuera de la célula.
- d) Inhibición de la entrada de fármacos en la célula.
Respuesta: c) Expulsión activa de fármacos fuera de la célula.. El mecanismo MDR mediado por bombas implica la expulsión activa de fármacos fuera de la célula, reduciendo su concentración intracelular y disminuyendo su eficacia.
- ¿Cuál es el papel de la proteína Bcl-2 en la resistencia a múltiples fármacos (MDR)?
- a) Inhibir la apoptosis.
- b) Facilitar la expulsión de fármacos.
- c) Aumentar la captación de fármacos.
- d) Promover la degradación de fármacos.
Respuesta: a) Inhibir la apoptosis.. La proteína Bcl-2 es una proteína antiapoptótica cuyo desarrollo contribuye a la resistencia a múltiples fármacos al inhibir la apoptosis celular, permitiendo que las células resistentes sobrevivan a pesar de la presencia de fármacos citotóxicos.
- ¿Cuál de las siguientes estrategias se utiliza en la nanomedicina para combatir la resistencia a múltiples fármacos (MDR)?
- a) Aumentar la expresión de glicoproteína-P.
- b) Inhibir la expresión de proteínas antiapoptóticas.
- c) Combinar la transfección génica con la liberación de citotóxicos.
- d) Disminuir la permeabilidad de la membrana celular.
Respuesta: c) Combinar la transfección génica con la liberación de citotóxicos.. La nanomedicina propone combinar la transfección génica con la liberación controlada de citotóxicos para superar la resistencia a múltiples fármacos. Esto permite atacar las células cancerosas de manera más efectiva.
16. Partículas Metálicas: Oro, Aplicaciones in vivo
Flashcards
- ¿Qué tipo de material se utiliza para transportar el material genético en la terapia génica in vivo?
- Nanopartículas de oro.
- ¿Qué oncogén se silencia mediante el uso de nanopartículas de oro?
- Myc.
- ¿Qué es el efecto EPR?
- Enhanced Permeability and Retention (Mayor Permeabilidad y Retención).
- ¿Cuál es el primer paso en el proceso de silenciamiento génico mediado por nanopartículas de oro después de la administración in vivo?
- EPR (Mayor Permeabilidad y Retención).
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es el principal objetivo de utilizar nanopartículas de oro en la terapia génica in vivo?
- a) Aumentar la toxicidad de los fármacos en las células cancerosas.
- b) Facilitar la entrega de material genético para silenciar oncogenes como Myc.
- c) Mejorar la visualización de las células tumorales mediante resonancia magnética.
- d) Estimular el crecimiento celular en tejidos dañados.
Respuesta: b) Facilitar la entrega de material genético para silenciar oncogenes como Myc.. Las nanopartículas de oro se utilizan para transportar material genético que silencia oncogenes, interrumpiendo el crecimiento tumoral.
- ¿Qué ventaja ofrecen las nanopartículas de oro en comparación con otros métodos de transfección génica?
- a) Mayor facilidad para cruzar la barrera hematoencefálica.
- b) Capacidad de ser guiadas magnéticamente hacia el tumor.
- c) Posibilidad de controlar la liberación del material genético mediante estímulos externos.
- d) Reducción significativa de la respuesta inmune del paciente.
Respuesta: c) Posibilidad de controlar la liberación del material genético mediante estímulos externos.. Las nanopartículas de oro permiten una liberación controlada del material genético en respuesta a estímulos, optimizando la eficacia del tratamiento.
- ¿Cuál de los siguientes procesos es clave para la eficacia de las nanopartículas de oro en la terapia génica contra el cáncer?
- a) La activación directa del sistema inmunológico por las nanopartículas.
- b) La internalización de las nanopartículas por las células tumorales y la posterior liberación del material genético.
- c) La capacidad de las nanopartículas para reparar el ADN dañado en las células tumorales.
- d) La inhibición de la metástasis a través de la acumulación de nanopartículas en los vasos sanguíneos.
Respuesta: b) La internalización de las nanopartículas por las células tumorales y la posterior liberación del material genético.. La internalización y la posterior liberación del material genético dentro de las células tumorales son cruciales para silenciar los oncogenes y detener el crecimiento del tumor.
17. CRISPR Cas9
Flashcards
- ¿Qué es CRISPR-Cas9?
- Una técnica de edición genética que permite modificar secuencias de ADN de manera precisa.
- ¿Qué función tiene la enzima Cas9?
- Actúa como una tijera molecular que corta el ADN en un sitio específico.
- ¿Qué es el ARN guía en CRISPR-Cas9?
- Una molécula de ARN que dirige la enzima Cas9 al sitio específico del ADN que se va a editar.
- ¿Qué significa la secuencia PAM?
- Protospacer Adjacent Motif, una secuencia de ADN necesaria para que Cas9 pueda unirse y cortar el ADN.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es la función principal de la técnica CRISPR-Cas9?
- a) Bloquear la replicación viral en células infectadas
- b) Corregir o editar genes específicos en el ADN
- c) Aumentar la producción de proteínas en las células
- d) Transportar fármacos directamente al núcleo celular
Respuesta: b) Corregir o editar genes específicos en el ADN. La técnica CRISPR-Cas9 se utiliza principalmente para editar genes específicos en el ADN, permitiendo la corrección de mutaciones o la modificación de secuencias genéticas.
- ¿Qué significa PAM en el contexto de CRISPR-Cas9?
- a) Peptide-Associated Motif
- b) Protospacer Adjacent Motif
- c) Polymerase Amplification Method
- d) Post-Assembly Modification
Respuesta: b) Protospacer Adjacent Motif. PAM significa Protospacer Adjacent Motif, una secuencia corta de ADN necesaria para que la enzima Cas9 pueda unirse y cortar el ADN en el sitio deseado.
- ¿Cuál es el componente principal que guía la enzima Cas9 al sitio específico del ADN que se va a editar?
- a) Un plásmido
- b) Un ARN guía
- c) Un aptámero
- d) Una ribozima
Respuesta: b) Un ARN guía. El ARN guía es el componente que dirige la enzima Cas9 al sitio específico del ADN que se va a editar, asegurando que la modificación genética se realice en el lugar correcto.
18. Partículas Metálicas: Magnetita
Flashcards
- ¿Qué tipo de partícula metálica se combina con la hipertermia en la transfección génica?
- Magnetita
- ¿Qué ventaja principal ofrece la magnetita en la transfección génica?
- Permite combinar hipertermia con la transfección
- ¿Qué molécula se utiliza comúnmente para recubrir las nanopartículas de magnetita?
- Polietilenimina (PEI)
- ¿Cuál es el objetivo de combinar hipertermia con magnetita en la terapia génica?
- Aumentar la eficiencia de la transfección
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es la principal aplicación de la combinación de magnetita con transfección génica?
- a) Aumentar la eficiencia de la electroporación
- b) Combinar hipertermia con transfección génica
- c) Facilitar la microinyección celular
- d) Mejorar la sonotransfección
Respuesta: b) Combinar hipertermia con transfección génica. La magnetita se utiliza en combinación con la hipertermia para mejorar la transfección génica, permitiendo un tratamiento más efectivo y localizado.
- ¿Qué ventaja ofrecen las nanopartículas de magnetita en la terapia génica?
- a) Disminuyen la respuesta inmune
- b) Aumentan la toxicidad celular
- c) Permiten la vectorización intracelular directa
- d) Mejoran la estabilidad y protección del material genético
Respuesta: d) Mejoran la estabilidad y protección del material genético. Las nanopartículas de magnetita ofrecen buena estabilidad y protección para el material genético, lo que ayuda a que el material genético llegue a su destino sin degradarse.
- ¿Qué molécula se utiliza comúnmente para recubrir las nanopartículas de magnetita en la transfección génica?
- a) Fosfato de calcio
- b) Polietilenimina (PEI)
- c) Sílice mesoporosa
- d) Liposomas catiónicos
Respuesta: b) Polietilenimina (PEI). La polietilenimina (PEI) se utiliza para recubrir las nanopartículas de magnetita, facilitando la formación de complejos con el material genético y mejorando la transfección.
19. Nanopartículas Inorgánicas
Flashcards
- ¿Cuál es una ventaja de las nanopartículas inorgánicas en terapia génica?
- Buena estabilidad y protección para el material genético.
- ¿Qué tipo de nanopartícula inorgánica se disuelve dentro del endosoma debido a la bajada de pH?
- Fosfato de calcio.
- ¿Qué nanopartículas son fácilmente funcionalizables y útiles para la administración inhalada?
- Fulerenos y Nanotubos de Carbono (CNT).
- ¿Qué permite la estructura mesoporosa de las nanopartículas de sílice?
- Liberación controlada de ADN y fármacos.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál de las siguientes NO es una ventaja general de las nanopartículas inorgánicas en la terapia génica?
- a) Química muy avanzada
- b) Alta eficiencia de transfección
- c) Buena estabilidad y protección para el material genético
- d) No están sujetas a ataque microbiano
Respuesta: b) Alta eficiencia de transfección. Las nanopartículas inorgánicas generalmente tienen una eficiencia de transfección más baja en comparación con otros métodos.
- ¿Qué característica del fosfato de calcio facilita la captación de ADN por el núcleo?
- a) Su alta toxicidad
- b) Su interacción con el ácido nucleico
- c) Su disolución fuera del endosoma
- d) Su estabilidad en pH alto
Respuesta: b) Su interacción con el ácido nucleico. Los complejos de Ca-DNA mejoran la captación de ADN por el núcleo.
- ¿Cuál de las siguientes nanopartículas inorgánicas se utiliza en la terapia génica para la administración inhalada?
- a) Magnetita
- b) Sílice mesoporosa
- c) Fulerenos y CNT
- d) Fosfato de calcio
Respuesta: c) Fulerenos y CNT. Los fulerenos y los nanotubos de carbono (CNT) son fácilmente funcionalizables y se utilizan para la administración inhalada, reduciendo los efectos secundarios en terapias para enfermedades pulmonares crónicas.
20. NP's Fosfato de Calcio
Flashcards
- ¿Qué tipo de biocompatibilidad presentan las NP's de fosfato de calcio?
- Alta biocompatibilidad.
- ¿Qué interacción clave se produce entre las NP's de fosfato de calcio y el material genético?
- Interacción fase sólida – Fosfato A.Nucleico.
- ¿Qué ventaja ofrece la disolución del CaP dentro del endosoma?
- Facilita el escape endosomal del material genético.
- ¿Qué efecto tiene la bajada de pH en el endosoma sobre las NP's de fosfato de calcio?
- Provoca la disolución del CaP.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es una característica clave de las nanopartículas de fosfato de calcio (NP's CaP) que las hace atractivas para la terapia génica?
- a) Baja biocompatibilidad
- b) Alta toxicidad celular
- c) Alta biocompatibilidad
- d) Interacción mínima con ácidos nucleicos
Respuesta: c) Alta biocompatibilidad. Las NP's de fosfato de calcio destacan por su alta biocompatibilidad, lo que reduce el riesgo de efectos adversos en el organismo.
- ¿Qué ventaja ofrecen los complejos de Ca-DNA formados con nanopartículas de fosfato de calcio?
- a) Disminuyen la captación de ADN por el núcleo
- b) Mejoran la captación de ADN por el núcleo
- c) Aumentan la degradación del ADN en el citoplasma
- d) Dificultan la disolución del CaP en el endosoma
Respuesta: b) Mejoran la captación de ADN por el núcleo. Los complejos Ca-DNA facilitan la entrada del material genético al núcleo celular, mejorando la eficiencia de la transfección.
- ¿Cuál es el proceso que facilita la liberación del ADN de las nanopartículas de fosfato de calcio dentro de la célula?
- a) Aumento del pH endosomal
- b) Disolución del CaP en el citoplasma
- c) Bajada del pH en el endosoma
- d) Estabilización del CaP en el núcleo
Respuesta: c) Bajada del pH en el endosoma. La disminución del pH dentro del endosoma provoca la disolución del fosfato de calcio, liberando el ADN en el interior de la célula.
21. Nanopartícula Mesoporosas de Sílice
Flashcards
- ¿Qué son las nanopartículas mesoporosas de sílice?
- Materiales con poros de tamaño nanométrico utilizados para la administración de fármacos y terapia génica.
- ¿Cuáles son las dos etapas de liberación de las nanopartículas mesoporosas de sílice?
- Liberación de ADN libre y liberación del fármaco mesoporoso.
- ¿Qué es ATRP y cómo se relaciona con las nanopartículas mesoporosas de sílice?
- Es la polimerización radicalaria por transferencia de átomos, utilizada para modificar la superficie de las nanopartículas.
- ¿Qué ventajas ofrecen las nanopartículas mesoporosas de sílice en la terapia génica?
- Protección del material genético y liberación controlada en el interior de las células.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es una característica principal de las nanopartículas mesoporosas de sílice?
- a) Liberación controlada de ADN y fármacos
- b) Inestabilidad en medios biológicos
- c) Alta toxicidad celular
- d) Incapacidad para proteger el material genético
Respuesta: a) Liberación controlada de ADN y fármacos. Las nanopartículas mesoporosas de sílice están diseñadas para liberar ADN y fármacos de manera controlada gracias a su estructura porosa, lo que las hace útiles en terapia génica y administración de fármacos.
- ¿Qué ventajas ofrecen las nanopartículas mesoporosas de sílice en comparación con otros sistemas de administración de fármacos?
- a) Mayor inmunogenicidad
- b) Mayor estabilidad y protección del material genético
- c) Menor capacidad de internalización celular
- d) Mayor costo de producción
Respuesta: b) Mayor estabilidad y protección del material genético. Las nanopartículas mesoporosas de sílice ofrecen buena estabilidad y protección para el material genético, lo que las hace más efectivas en la administración de fármacos y terapia génica en comparación con otros sistemas.
- ¿Qué proceso se utiliza para modificar la superficie de las nanopartículas mesoporosas de sílice?
- a) Atom transfer radical polymerization
- b) Electroforesis capilar
- c) Cromatografía de gases
- d) Espectrometría de masas
Respuesta: a) Atom transfer radical polymerization. La polimerización radicalaria por transferencia de átomos (Atom Transfer Radical Polymerization, ATRP) se utiliza para funcionalizar y modificar la superficie de las nanopartículas mesoporosas de sílice, permitiendo la unión de diferentes moléculas y mejorando su biocompatibilidad y capacidad de administración.
22. Fulerenos y CNT
Flashcards
- ¿Qué son los fulerenos y los CNT?
- Son estructuras fácilmente funcionalizables utilizadas en la administración de fármacos.
- ¿Qué ventaja ofrece la administración inhalada de fulerenos?
- Reduce los efectos secundarios en comparación con otras vías de administración.
- ¿Qué enfermedades pulmonares pueden ser tratadas con fulerenos?
- EPOC, asma y fibrosis quística.
- ¿Qué función tiene el PEG en la administración de fulerenos?
- Facilita la penetración en la mucosa.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es una característica clave de los fulerenos y CNT que los hace útiles en la administración de fármacos?
- a) Su baja capacidad para ser funcionalizados.
- b) Su dificultad para generar estructuras complejas.
- c) Su facilidad para ser funcionalizados.
- d) Su inestabilidad en entornos biológicos.
Respuesta: c) Su facilidad para ser funcionalizados.. Los fulerenos y CNT son fácilmente funcionalizables, lo que permite la creación de diversas estructuras para la administración de fármacos.
- ¿Cuál de las siguientes NO es una aplicación de los fulerenos en la terapia?
- a) Terapia para enfermedades pulmonares crónicas.
- b) Reducción de efectos secundarios mediante administración inhalada.
- c) Aumento del volumen regulador celular.
- d) Administración dirigida a células del parénquima pulmonar.
Respuesta: c) Aumento del volumen regulador celular.. Los fulerenos disminuyen el volumen regulador (RDV), en lugar de aumentarlo, al facilitar la fusión de vesículas intracelulares hipotónicas.
- ¿Qué propiedad de los fulerenos facilita su penetración en la mucosa?
- a) La presencia de RDV (Receptor de la vitamina D).
- b) La presencia de PEG (Polietilenglicol).
- c) Su carga negativa.
- d) Su gran tamaño molecular.
Respuesta: b) La presencia de PEG (Polietilenglicol).. El PEG (Polietilenglicol) facilita la penetración de los fulerenos en la mucosa.
23. Partículas lipídicas (transporte RNAm)
Flashcards
- ¿Qué son los lipoplejos?
- Son liposomas catiónicos utilizados para la transfección, caracterizados por una capa bilipídica.
- ¿Qué problema presentan los lipoplejos?
- Inestabilidad y baja eficiencia en comparación con otras nanopartículas lipídicas.
- ¿Qué componentes forman una nanopartícula lipídica?
- Lípidos sensibles al pH, aminas cuaternarias, lípidos auxiliares neutros y lípidos silenciados (PEG).
- ¿Qué es Onpattro y para qué se utiliza?
- Es una nanopartícula lipídica utilizada para silenciar la transtiretina (TTR) en la amiloidosis hereditaria ATTR.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es la principal desventaja de los lipoplejos en la transfección?
- a) Alta eficiencia
- b) Estabilidad
- c) Baja eficiencia
- d) Versatilidad en el diseño
Respuesta: c) Baja eficiencia. Los lipoplejos, aunque útiles, sufren de inestabilidad y baja eficiencia en comparación con otras nanopartículas lipídicas más avanzadas.
- ¿Qué lípidos se utilizan en la formulación de nanopartículas lipídicas para hacerlas sensibles al pH?
- a) Lípidos neutros
- b) Aminas cuaternarias
- c) Lípidos silenciados con PEG
- d) Lípidos catiónicos
Respuesta: b) Aminas cuaternarias. Las aminas cuaternarias se incorporan en las nanopartículas lipídicas para conferirles sensibilidad al pH, facilitando la liberación del material genético en el entorno adecuado.
- ¿Qué función tienen los lípidos silenciados (PEG) en las nanopartículas lipídicas?
- a) Aumentar la eficiencia de la transfección
- b) Proporcionar sensibilidad al pH
- c) Mejorar la estabilidad de la capa bilipídica
- d) Modular la respuesta inmune y aumentar la estabilidad en circulación
Respuesta: d) Modular la respuesta inmune y aumentar la estabilidad en circulación. Los lípidos silenciados con PEG ayudan a evitar la detección por el sistema inmunitario y mejoran la estabilidad de la nanopartícula en el torrente sanguíneo.
24. Generación de anticuerpos específicos en CAR T-Cells
Flashcards
- ¿Cuál es la función del dominio scFv en las células CAR T?
- Reconoce directamente un antígeno tumoral.
- ¿Qué función tiene la bisagra o 'spacer' en las células CAR T?
- Proporciona flexibilidad y define la distancia con la membrana.
- ¿Qué dominios intracelulares activan y expanden la célula T al reconocer el antígeno?
- CD3ζ + coestimuladores (CD28 o 4-1BB).
- ¿Cuál es el origen del dominio scFv?
- Anticuerpo monoclonal.
Preguntas tipo test
- ¿Cuál es la función principal del dominio scFv en las células CAR T?
- a) Activar la célula T al reconocer el antígeno
- b) Fijar el CAR en la membrana celular
- c) Reconocer directamente un antígeno tumoral
- d) Dar flexibilidad a la estructura del CAR
Respuesta: c) Reconocer directamente un antígeno tumoral. El dominio scFv es un fragmento de anticuerpo monoclonal diseñado para reconocer y unirse directamente a un antígeno específico presente en las células tumorales, como CD19 o BCMA.
- ¿Qué dominios intracelulares son esenciales para activar y expandir la célula T después de que el CAR reconoce el antígeno?
- a) CD8 o CD28
- b) IgG o CD8
- c) CD3ζ y coestimuladores (CD28 o 4-1BB)
- d) scFv
Respuesta: c) CD3ζ y coestimuladores (CD28 o 4-1BB). Los dominios intracelulares CD3ζ, junto con los coestimuladores CD28 o 4-1BB, son cruciales para la activación y expansión de la célula T después de que el CAR se une al antígeno en la célula tumoral.
- ¿Cuál es el propósito de la bisagra o 'spacer' en la estructura de las células CAR T?
- a) Reconocer el antígeno tumoral
- b) Activar la célula T
- c) Fijar el CAR en la membrana celular
- d) Proporcionar flexibilidad y definir la distancia con la membrana
Respuesta: d) Proporcionar flexibilidad y definir la distancia con la membrana. La bisagra o 'spacer' proporciona flexibilidad a la estructura del CAR y ayuda a definir la distancia entre el dominio de reconocimiento del antígeno y la membrana celular, optimizando la unión al antígeno.
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Texto del documento
Introducción a la Transfección Génica Tema 4 Terapia génica Gene Therapy... ----idea is to replace defective genes Gene therapy is a technique for correcting defective genes responsible for disease development. Indice Transfección Modos de transfección Aplicaciones in vitro e in vivo Nanoparticulas como herramientas de transfección Partículas Inorgánicas Partículas Orgánicas (Lípidos) Ácidos nucleicos como agentes terapéuticos Transcripción y Traducción Expresión de un gen Proceso de Elaboración de proteínas Ácidos nucleicos como agentes terapéuticos 1. Antisense RNA 2. Plásmidos 3. Ribozymes 4. Aptámeros 5.
Interfering RNAs or RNAi El término oligonucleótidos antisentido se refiere a moléculas hechas de material genético sintético o no , que interactúan con el material genético natural (ADN o ARN) que alberga la información para la producción de proteínas. Que es un oligonucleótido anti sentido?? 1. Antisense RNA and oligonucleotides Pequeños fragmentos de ácido nucleico monocatenario (15–25 bases). Diseñados para unirse de forma complementaria al ARN mensajero (ARNm) de un gen específico. Su unión bloquea la traducción o modifica el procesamiento del ARNm.
Fomivirsen (VitraveneTM) Mientras tanto, hasta 50 nuevos compuestos antisentido han entrado en la fase I/II y, en algunos casos, en ensayos de fase III. -Es un agente antiviral oftálmico. Se administra mediante inyección intravítrea tratamiento de la infección por citomegalovírus (CMV) -El fomivirsen causa menos efectos secundarios y es más selectivo en sus acciones que otras terapias contra el CMV. Debido a su mecanismo de acción, el fomivirsen es más potente frente a CMV que el ganciclovir o el foscarnet. -La inyección de fomivirsen también parece estar asociada con una menor incidencia de desprendimiento de retina que el implante intravítreo de ganciclovir.
Silenciamiento génico Antisense RNA Plásmido: Los plásmidos son moléculas pequeñas de ADN circular capaces de replicarse de forma autónoma, independientemente del cromosoma Extracromosómico 30 a 100 genes Transfección génica: Proceso por el cual secuencias de ácidos nucleicos son introducidas en el interior de una célula Plásmido fragmento ADN Vectorización Nuclear Transfección génica Plasmido: ¿Estable ó Transitoria? Se integra en el cromosoma (heredable) No Se integra en el cromosoma Se transcribe por si solo Interactúa con ribosoma por si solo Acidos nucleicos como agentes terapeuticos 1. Acidos Nucleicos 1. Antisense RNA and oligonucleotides 2. Ribozymes 3. Aptameros, 4.
Interfering RNAs or RNAi ¿Qué es una Ribozima? 1) Enzyme 2) Ribonucleic Acid NOT PROTEIN 1989 Nobel Prize In Chemistry Sid Altman Tom Cech Secondary Structure Conserved base-pairing interactions result in... Three "stem" regions Uridine-containing turn An "augmenting helix" joining stems II and III Ribozyme vs. tRNA Phe folding ARN de transferencia (tRNA) Catalytic Mechanism Intact Phosphodiester Mg2+ Coordinated Transition Cleaved Phosphodiester Ruptura Péptido sintetasa Ribozima del intrón del Tetrahymena thermophila primera descubierta, se autocorta.
Ribozima del ribosoma (ARNr 23S) cataliza la formación del enlace peptídico durante la síntesis de proteínas Catalytic Mechanism New crystal structure shows five Mg2+ sites: In Clinical Trial... ANGIOZYME TM HEPTAZYME TM Ribozyme designed to inhibit Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF)... ANGIOGENESIS Ribozyme targets highly conserved sequences of the Hepatitis C Virus... HCV DRUG RESISTANCE Acidos nucleicos como agentes terapeuticos 1. Acidos Nucleicos 1. Antisense RNA and oligonucleotides 2. Ribozimas 3. Aptameros, 4. Interfering RNAs or RNAi apto: "to fit" mer: "smallest unit of repeating structure" ¿Qué es un Aptámero?
Los aptámeros son monocatenarios oligonucleótidos plegados que se unen a dianas moleculares (proteínas) con alta afinidad y especificidad Estructura de Aptámeros Nature Structural Biology, 7(1):53-57 Sus estructuras terciarias únicas permiten que los aptámeros se plieguen en andamios estables para llevar a cabo el reconocimiento molecular van der Waals, los enlaces de hidrógeno y las interacciones electrostáticas impulsan la unión de dianas de alta afinidad Diseñado para bloquear las interacciones proteína-proteína Compartir las propiedades tanto de las moléculas pequeñas como de los productos biológicos SELEX (Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment) Tuerk and Gold (1990) Science 249, p505-510 Aptámeros - son ácidos nucleicos de cadena sencilla (ssDNA y RNA), aislados de genotecas de oligonucleótidos por selección in vitro, mediante enriquecimiento exponencial en presencia del ligando (método SELEX), denominados anticuerpos químicos (del inglés chemical antibodies).
Systematic Evolution of Ligands by EXponential enrichment Tienen una región central de tamaño variable y con una secuencia aleatoria, y dos regiones de secuencia conocida. La longitud total del aptámero suele variar entre los 70 y los 100 nucleótidos, incluyendo una secuencia fija o "primer" en cada extremo del aptámero, para su amplificación. Adoptan estructuras globulares lo que les permite exhibir unas complejas y sofisticadas propiedades de reconocimiento molecular siendo capaces de unirse de una manera estable y muy específica a sus dianas. Dichas dianas moleculares pueden ser pequeñas moléculas como ATP, proteínas, ácidos nucleicos y complejas estructuras multiméricas.
Acidos nucleicos como agentes terapeuticos 1. Acidos Nucleicos 1. Antisense RNA and oligonucleotides 2. Ribozymes 3. Aptameros, 4. Interfering RNAs or RNAi RNAi Mecanismo biológico donde double-stranded RNA (dsRNA) interfiere con la expresión de un gen particular que comparte una secuencia homologa con dsRNA. Los ARN interferentes son moléculas pequeñas (de 20 a 25 nucléotidos) que se generan por fragmentación de precursores más largos.
Se pueden clasificar en tres grandes grupos de molécula: siRNA ( small interfering RNA) miRNA micro-ARN o mi-ARN es un ARN monocatenario, de una longitud de entre 21 y 25 nucleótidos, que tiene la capacidad de regular la expresión de otros genes mediante diversos procesos, utilizando para ello la ruta de ribointerferencia Silenciamiento génico RNAi, SiRNA silenciamiento post- transcripcional Knock-down o Knock-out Vectorización Al citoplasma Tipos de Transfección génica Tipos de Transfección génica Fusión de membrana Retrovirus Endocitosis Adenovirus Transfección Vírica Transfección Vírica Utilizan el mecanismo de infección Virus Problemas de seguridad (recombinación de genes) Inmunogenicidad adenovirus (Ad), adenoasociados (AAV), retrovirus, lentivirus Transfección Vírica Virus Oncolíticos Efectos Lísis de celulas tumorales Activación del Sistema Inmune Las células normales activan interferones (IFN-I) al detectar infección viral.
Esto induce genes antivirales que bloquean la replicación del virus. Las células tumorales frecuentemente tienen defectos en esta vía (por mutaciones o silenciamiento de genes de señalización).
Proteinas recombinantes TAT (activador transcripcional transactivante) Cell-Penetrating Peptides CCP (peptidos penetrantes) Proteinas recombinantes Métodos físicos de Transfección Electroporación (introducción de Plásmidos) Microperación, Nucleoinfección Sonotransfección Microinyección (célula a célula) Transfección No Vírica (Química) Eliminan el factor inseguro inmunogénico Problemas de baja transfección Polimeros catiónicos Nanocapsulas poliméricas Liposomas Dendrimeros Partículas inorgánicas Terapia Génica La terapia génica es una técnica para corregir genes defectuosos responsables del desarrollo de una enfermedad.
Se pueden utilizar varias aproximaciones para corregir ese defecto genético: Un gen normal puede insertarse en una ubicación no específica dentro del genoma para reemplazar un gen no funcional. Este enfoque es el más común. -Un gen anormal podría intercambiarse por un gen normal a través de recombinación homóloga.
El gen anormal podría repararse mediante la inversión selectiva de la mutación, que devuelve el gen a su función normal La regulación (el grado en que un gen se activa o desactiva) de un un gen en particular que pudiera estar alterado Terapia Génica Condiciones para una terapia exitosa (gran desafío) Tratamiento de enfermedades cuyo origen sea por defecto de un solo gen Vectorizar correctamente el tratamiento a las células correctas Que la trasfección se produzca de una forma eficiente Activación o silenciamiento efectivo y selectivo (generación de células tumorales) Baja respuesta inmune Tratamiento o la prevención de trastornos genéticos mediante la transferencia de material genético terapéutico (ADN o ARN) en un grupo de células (un tejido u órgano) , Terapia Génica Objetivo: expresión de versión correcta de la proteína endógena deficiente Aplicaciones: Trastornos genéticos Cáncer Cardiovasculares Terapia Génica técnicas "ex vivo" Barreras biológicas para la transfección génica "ex vivo" 1.
Proteger el transgén contra la degradación por las nucleasas presentes en la matriz extracelular (ECM) 2. Aumentar la difusión del transgén a través de la matriz 3. Llevar el transgén a través de la membrana plasmática de las células diana 4. Facilitar la migración intracelular del transgén al núcleo y limitar la degradación del transgén por nucleasas intracelulares 5.
Llevar el transgén a través de la envoltura nuclear Misiones para el vector Terapia Génica técnicas "in vivo" Terapia Génica técnicas "in vivo" Métodos químicos basados en Nanopartículas Nanopartículas Inorgánicas y Poliméricas Polivalencia NP´s Inorgánicas Sistemas Híbridos Polímeros Ingeniería de nano-materiales Tratamientos Efecto Sinérgico Funcionamiento de sistemas hibridos SINERGIA NP+génica Transfección+imagen+ principio activo SPION MRI Hipertermia Gold CT Fotodinámica GO (Öxido de Grafeno) MRI-CT Resistencia a múltiples fármacos (Multidrug Resistance) (MDR) (Pump no Pump mediated) Pump no Pump Desarrollo de Bcl-2 Proteina antiapoptótica.
Propuesta de la Nanomedicina contra MDR Combinación transfección génica y liberación de citotóxico RNAi, SiRNA Partículas Metálicas: Oro, Aplicaciones in vivo Silenciamiento de Oncogén Myc Mediante nanotransportador Vectorizado estímulo/respuesta 1. EPR 2. Internalization 3. Disassembly 4. Silencing Partículas Metálicas: Oro In vitro Localización Núcleo On/Off In vivo CRISPR Cas9 Francisco Juan Martínez Mojica PAM 5'-NGG-3 ¿Qué podemos transportar para CRISPR/CAS9? Partículas Metálicas: Magnetita, Combinación hipertermia con transfección génica Partículas Metálicas: Magnetita CRISPR Cas9 Eficiencia de transfección Nanopartículas Inorgánicas Ventajas y desventajas 1. Química muy avanzada 2.
Eficiencia de transfección baja (en general) 3.No están sujetas ataque microbiano 4. Buena estabilidad y protección para el material genético Tipos 1. Fosfato de calcio 2. Nanotubos de carbono 3. Sílice 4. Oro 5. Magnetita 6. Quantum Dots 7. Fosfato de estroncio 8. Magnesio fosfato 9. Fosfato de manganeso 10.
Hidróxidos dobles (arcillas aniónicas) NP´s Fosfato de Calcio Alta Biocompatibilidad Interacción Fase sólida –Fosfato A.Nucleico Formulaciones muy diferentes NP´s Fosfato de Calcio Alta protección Protección del ADN Disolución del CaP Dentro del endosoma Bajada de pH-Escape endosomal Complejos Ca-DNA Mejoran la captación de ADN por el nucleo Nanopartícula Mesoporosas de Sílice Dos etapas de liberación ADN-Libre +drug mesoporoso Atom transfer radical polymerization Fulerenos y CNT Fácilmente funcionalizables generación de estructuras Fulerenos: Nuevas formas de administración Administración inhalada reduce side-effects Terapia para enfermedades pulmonares crónicas EPOC (enfermedad pulmonar obstructiva crónica) Asma Fibrosis quística Internalización en células parenquimia pulmonar Receptor de la vitamina D RDV: Disminución del Volumen regulador La presencia de fusión de vesículas intracelulares hipotónicas PEG: Facilita penetración en mucosa Partículas lipídicas (transporte RNAm) Lipoplexo: Liposoma catiónico Capa bilipídica Inestabilidad Baja eficiencia Pocas posibilidades de diseño Nanoparticula Lipídica: Lipidos sensible a pH Aminas cuaternarias+ lípidos auxiliares neutros+ Lipidos silenciados(PEG) Nucleo +capa lipídica Partículas lipídicas (transporte RNAm) Onpattro amiloidosis hereditaria ATTR Silenciamiento de la "transtiretina" (TTR) (no formacióon beta amiloide Partículas lipídicas (síntesis) Lípidos catiónicos Partículas lipídicas (síntesis) Liposoma catiónico Partículas lipídicas (síntesis) EtOH Buffer acido Micela Invertida ADN Dialización para aumentar pH a fisiológico Liberación de mRNA (mensajero) para inmunología Generación de anticuerpos específicos en CAR T-Cells Región Origen Función scFv (fragmento de anticuerpo) Anticuerpo monoclonal Reconoce directamente un antígeno tumoral (por ejemplo, CD19, BCMA) Bisagra o "spacer" IgG o CD8 Da flexibilidad y define la distancia con la membrana Dominio transmembrana CD8 o CD28 Fija el CAR en la membrana celular Dominios intracelulares CD3ζ + coestimuladores (CD28 o 4-1BB) Activan y expanden la célula T al reconocer el antígeno